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耗子尾汁是包括我在内的一众生物汪必不可少的实验材料与样品。在我博士期间,至少用过4种耗子尾汁,少了哪一种,我估计我都毕不了业。
首先明确耗子的定义,在实验室,大鼠(Rat)和小鼠(Mouse)都是耗子,豚鼠勉强也算一个。
第一种,就是不少人提到的Rat Tail Collagen 1。是一种从大鼠尾中提取的胶原蛋白。鼠尾中胶原蛋白含量极高,在实验室中我们往往会选择从中提取胶原蛋白来用作实验。
刚才有个朋友就问我了,说C·Liu老师你是不是骗人?
我一看,嗷!原来是佐田,他看到的一个介绍胶原蛋白的文章。
里面光说了胶原蛋白有美容的效果,但是完全没讲他在科研中的应用。要知道,这可是我博士课题必不可少的材料,没有它我根本毕不了业,下面我就来简单介绍下它的作用。
首先,我们的细胞在体内并不是长在悬空状态。它们需要细胞外基质支撑包裹。耗子尾汁中胶原蛋白,就是这个细胞外基质最重要的组成成分。我们做细胞实验中使用的很多细胞(癌症细胞等皮实细胞除外), 其实是很娇气的,它们需要模拟体内的环境才能存活。所以需要在培养材质的表面镀一层胶原蛋白的膜,这个过程我们称为Coating。每次试验Coating是一个很重要的步骤,依靠这一步营造出来的环境,细胞才能长的白白胖胖的。
除了让细胞长的白白胖胖,一些实验,特别是研究产生胶原蛋白的成纤维细胞的实验,也需要使用耗子尾汁胶原蛋白。比如说花了我几个月时间来进行优化的胶原蛋白收缩实验,就要评估细胞让胶原蛋白收缩的能力,没这些实验,我论文都发表不了,毕业难度也会加大。
你要问能不能喝?
原装的为了维持液态,酸度很高。中和后会凝固,可吃,吃起来必须大补(雾)。不过这样一瓶几十毫升的,大概要几千块钱吧。
第二种,就是转基因小鼠必备的耗子尾汁DNA。
在转基因动物,譬如基因敲除动物的使用过程中。有时候需要使用杂合子父母繁殖纯合子耗子用以实验。有时需要提取后代耗子的DNA进行基因型的检测, 这个过程称为Genotyping。DNA的来源往往是耗子的一部分组织,通常为耳朵,脚趾和尾巴。
由于尾巴最好取样,所以我上千只老鼠的DNA都是从尾巴中提取的。基本操作就是剪一小段耗子尾巴。然后碱液裂解后制备耗子尾汁。我还记得那阵子我一天需要点上百个耗子尾汁,根本顾不上讲武德,天天满脑子都是耗子尾汁。
没有耗子尾汁,我连我耗子基因型都不知道,更没法毕业了。
至于这种耗子尾汁能不能吃, NaOH提取后中和不就喝点盐水嘛,而且还煮了半小时,含有蛋白质和DNA。约等于加盐肉汤。能吃,可太能吃了。
第三种,就是耗子尾尖取血,由于是尾巴上渗出来的液体,也可以称为耗子尾汁。
这种耗子尾汁,是在需要检测耗子血液中的成分时,非常简单易得的材料,对耗子的伤害也最小。我博士课题使用了耗子糖尿病模型,每次给耗子检测血糖,看有没有得糖尿病时,都要取一点耗子尾汁(血)。
这种耗子尾汁其实也就是血水,那血水当然也是可以喝的嘛。
第四种,也是我接触过最残忍的耗子尾汁。
博士最后一年接了一个合作项目,研究某止血物质的止血作用,止血物质的市场还是很大的,每年手术中失血过多而死的病人不少。
但我们不可能直接给大动物或者人测试这个材料。最后选择了小鼠尾流血模型。其本质和第三种一样,剪一段尾巴(一般是很长一段),然后统计对照组和实验室的流血时间与体积。
可以看到流血的小鼠的尾巴血液泡在生理盐水中,会形成一条细线,可以根据线的持续时间定量流血的时间。然后取离心管中的耗子尾汁,定量血液的含量。
我还算善良的,一些实验室会定量流血致死的时间,让耗子尾流血流干。一只鼠大概2毫升的血液,
多收一点,可能可以搞个鼠血旺?
尾巴由于离耗子嘴巴远,且分布着多条重要的血管,是非常理想的取样位置。耗子尾汁在生命科学研究中也非常重要。上面这四种耗子尾汁,是我博士期间几乎天天都在用的,贯穿了我的博士生涯。
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我前几天一个吐槽养细胞的回答为啥突然多了这么多的赞?你们偷袭我一个知乎小透明,我大E了没有闪啊…
关于鼠尾胶原蛋白算不算耗子尾汁我就搞不清楚了,倒是本身高纯度的鼠尾胶原蛋白是能吃的,就是一种蛋白质。当然实验室里制备出来的各种材料和原材料都不应该被食用,实验室也是禁食的。好好养细胞,别想那么多。
鼠尾胶原蛋白|型(rattailtendon collagen type l)是通过Birkedal-Hansen的方法,通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真 实的生长环境,使细胞在 三维环境中生长。
1,在使用鼠胶原蛋白I型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。
2,在1mg/ml浓度以上,pH 为7左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞 在三维胶内正常生长、PC-12 细胞在三维胶表面正常生长。